----快速、准确、经济:CRISPR技术在疾病检测中的崛起//----健康频道 http:// //
图3 SHERLOCK检测结果
加州大学伯克利分校的Doudna团队发现当Cas12a蛋白在剪切靶向的dsDNA 后能高效地切割非特异性单链 DNA(ssDNA),基于此开发了DETECTR(DNA Endonuclease Targeted CRISPR Trans Reporter)技术(图4); 该系统包含Cas12a、靶向特定序列的sgRNA和非特异性 ssDNA 荧光报告序列(FQ-labeled reporter)。一旦Cas12a检测到目的 DNA序列便会切割靶序列,接着荧光报告序列也会被切割,从而释放出荧光信号。DETECTR 技术可以准确地检测出是否有高危型HPV病毒感染:HPV16(100%)、HPV18 (92%)。DETECTR测试单次成本不到一美元,只需一个小时;该技术具有快速、准确、易用的特点,尤其适合HPV的大规模普查。“这是CRISPR领域特别令人兴奋的方向”, 加州大学伯克利分校的生物化学家Jennifer Doudna说。
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