陈列平团队发现又一肿瘤免疫逃逸新通路( 五 ) 本文来自：BioArt（ID：BioGossip）

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图2 TCAA筛选系统图示

TCAA包含超过6500个人类基因，编码人类基因组中超过90%的跨膜蛋白，单个基因在阵列中短暂表达。他们设计了一种基于293T细胞的人工抗原呈递细胞系（aAPC），该细胞系表达一种用于T细胞受体激活的膜相关抗人CD3（OKT3）单链可变片段（scFv），以及一些跨膜信号转导基因（DAP10、DAP12、FCER1G和CD3Z）以促进膜蛋白表达【1】。研究者使用Jurkat T细胞来检测靶基因的功能及其对T细胞活性的影响，Jurkat T细胞中稳定表达了一个由NF-κB或NFAT反应元件驱动的绿色荧光蛋白（green fluorescence protein, GFP）报告基因。这样通过与空白对照组对比，就可以利用GFP信号强弱来鉴定aAPC上表达的膜蛋白对T细胞活性的影响。持续抑制或增强GFP信号的基因在多轮TCAA筛选后被选择，随后在体内和体外进行综合分析。在这些候选基因中，一些是已经被报道的共刺激分子（B7-1, B7-2, CD200, CD70），凋亡相关基因（FASL, TRAIL, GZMB）或共抑制分子（KLRD1, BTN3A3等等），这也验证了TCAA系统的准确性。

通过TCAA系统筛选，研究团队发现Siglec-15可持续地抑制T细胞活性，并有可能满足正常化免疫治疗的主要特征【2】，因此被选择以进行后续研究。Siglec-15是一个唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素家族（Siglec family）基因，编码一个非常短的胞外结构域（ECD）【3】。蛋白质序列分析显示，Siglec-15 ECD包含一个免疫球蛋白可变区（IgV）和一个2型恒定区（IgC2），与B7基因家族具有30%以上的相似性。这些数据表明，Siglec-15与B7基因家族关系密切，可能与B7家族成员共享免疫调节功能。