伊成器组鉴定新型RNA修饰m6Am甲基转移酶( 三 )
----伊成器组鉴定新型RNA修饰m6Am甲基转移酶//----
为了鉴定该修饰酶 , 伊成器课题组从全细胞裂解液(来源于HEK293)中通过生化手段分离并鉴定了m6Am的修饰酶 , 并通过体内和体外实验 , 证实了PCIF1(phosphorylated CTD-interacting factor 1)的甲基转移酶活性:通过LC-MS/MS定量质谱发现PCIF1敲低细胞系中mRNA的m6Am修饰水平显著下降 , 通过体外生化实验表明PCIF1对带有m7G帽子结构的RNA具有最高的修饰活性 。 除此之外 , 研究还发现PCIF1在不同物种中保守性很高;例如文章还证实了小鼠PCIF1蛋白同样具有很高的甲基化活性 , 从而提示该甲基化酶在高等生物中都具有重要作用 。
特别值得一提的是 , 11月22日 , 来自东京大学的Tsutomu Suzuki课题组和Osamu Nureki合提足合作在Science杂志在线发表了Cap-specific terminal N 6-methylation of RNA by an RNA polymerase II-associated methyltransferase的研究论文(Research Article) , 也报道了m6Am修饰这一甲基转移酶PCIF1的发现与鉴定 , 解析了关键酶的蛋白晶体结构 , 还揭示了m6Am修饰催化形成的分子基础 。
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