淋巴瘤患者的福音！苏州大学探寻新的治疗靶点

责编 | 翊竑
弥漫大B细胞淋巴瘤（Diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL）是B细胞起源、具侵袭性临床表现、需高效力的化学治疗的恶性淋巴瘤【1】。目前广泛应用于临床的DLBCL预后评估标准是改良国际预后指数（National Comprehensive Cancer Network-International Prognostic Index, NCCN-IPI）【2】。但是， NCCN-IPI仅纳入了一些临床指标，却忽略了弥漫大B淋巴瘤的分子生物学异质性，导致NCCN-IPI仍不能对相当大一部分患者的预后进行准确及有效预测评估。
piRNA是一类小非编码RNA ，最近几年的研究发现piRNA异常表达与某些肿瘤的发生、发展及预后有关【3-5】。近期，苏州大学李炳宗和庄文卓团队在Blood杂志上发表了题为piRNA-30473 contributes to tumorigenesis and poor prognosis by regulating m6A RNA methylation in DLBCL 的研究论文。在本项研究中，研究人员首次发现了piRNA-30473表达量与DLBCL患者预后相关，其可作为DLBCL独立预后因子并有助于提高NCCN-IPI的预后效能。

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表观遗传学调控失衡是DLBCL发病机制之一。针对DNA甲基化和组蛋白甲基化修饰异常的表观遗传学药物已经在DLBCL中应用，但疗效有限【6-8】。这就需要我们探索新的表观遗传学修饰-RNA甲基化修饰在DLBCL的发生发展中的作用。随着表观遗传学与 RNA 生物学研究的不断深入，人们逐渐发现RNA甲基化与肿瘤的发生、发展及预后也存在着密切关系【9-11】。其中， 6甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine ， m6A），是发生在碱基A第六位N原子上的甲基化，近年来，掀起了新一轮关于m6A甲基化的表观遗传学研究热潮【12】。但是， m6A与DLBCL发生、发展及预后的关系仍是未知的。
基于以上研究基础，研究人员提出假设， piRNA-30473对DLBCL的调控是否是通过m6A甲基化来发挥作用的呢？为了证明这一猜想，研究人员首先通过基因缺失实验证明了，甲基化转移酶WTAP的表达量、稳定性及细胞的整体RNA甲基化水平受到piRNA-30473的调控。 WTAP是6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine ， m6A）甲基化酶复合物的成员之一，通过将具有催化功能的甲基转移酶METTL3（methyltransferase like 3, METTL3）和METTL14（methyltransferase like 14, METTL14）招募至特异的mRNA上，促进mRNA发生甲基化修饰【13, 14】。 miRanda软件预测及双荧光素酶报告基因实验证实piRNA-30473通过与WTAP的3’UTR结合，增加WTAP的表达水平，进而上调DLBCL细胞的甲基化水平。
基于以上研究基础，为了进一步探究m6A甲基化失衡在DLBCL中的作用机制，研究人员联合m6A-seq与RNA-seq ，对m6A甲基化修饰图谱和全转录本表达进行综合性分析，发现DLBCL中重要的癌基因HK2是WTAP的靶基因【15】。 WTAP表达水平的增加，使它的靶基因HK2的甲基化水平也显著升高。在低氧诱导条件下， HK2作为关键的代谢调控因子对维持DLBCL细胞生长具有关键意义【15】。生存分析也证实HK2可作为DLBCL的独立预后因子。以上结果提示， HK2转录水平的变化同样在DLBCL发生发展及预后中发挥着重要的作用。