根据 EngineeringForLife,3D打印支架技术进行血管再生的主题是一直是研究热点且极具重要性。然而,现有报道中关于这方面研究的系统性总结还相对缺乏。
近期来自哈尔滨工业大学的刘海涛副教授团队在Bio-Design and Manufacturing上发表了题为“3D printing of tissue engineering scaffolds: a focus on vascular regeneration”的长篇综述,从5个方面进行了阐述:1)面向血管再生的组织工程支架的意义和重要性;2)血管支架的三维建模方法;3)血管支架中常用的3D打印材料;4)血管支架制造中常见的3D打印技术;5)血管支架的临床转化。此外,鉴于传统制造技术的优势,论文还讨论了血管支架制备中常涉及的其它技术,包括铸造、静电纺丝及乐高积木式构建。
3D打印支架另辟蹊径
细胞的营养物质和氧气供给不足是制备大尺寸组织中面临的挑战。血管为营养物质的运输和组织器官的新陈代谢提供了渠道,且血管相关的疾病已成为主要死亡诱因之一。血管再生目的是修复受损组织和器官的结构和功能。血管再生方法包括:组织工程血管移植物的植入,血管腔中金属或塑料管的放置,手术旁路移植,血管成形术和不可生物降解导管的植入。血管构建旨在采用内皮细胞,平滑肌细胞,干细胞,生物活性分子,生物材料和相应的细胞聚集体或球体制造具有生物学功能和结构的血管。
血管构建的方法包括制造血管支架,血管脱细胞化,自组装血管移植物的制造以及随后的处理工艺(如生物反应器和培养添加剂的引入)。对血管移植物的需求很大,但常规自体植入和同种异体移植无法构造具有给定形状和功能的血管组织。许多传统制造技术可能存在各类缺陷。例如,微成型形成的支架有时缺乏细胞结合位点;自组装技术难以对血管的几何形状进行精确控制,脱细胞方法形成的支架难以细胞浸润。3D打印支架技术为该问题提供了解决方案。
本综述聚焦于现有的建模方法和制造血管支架的常用3D打印技术,系统讨论了3D打印支架技术应用于血管再生的可行性、血管化组织工程策略、支架技术相比无支架技术的优势,介绍了血管支架建模方法,打印材料和制备方法。详细讨论了相关的3D打印技术。另外还给出了3D打印支架技术初步评估支架性质的方法、临床转化过程及未来可能的研究方向(机器学习、近红外光聚合、4D打印、3D打印与自组装技术的结合)。
/1 血管组织工程支架的意义和重要性
3D打印支架技术应用于血管再生的可行性:血管为层级结构(图1),3D打印制备这种结构可行;支架为血管细胞提供生长微环境并指导细胞粘附,定位和定植,提供合理空间分布;调控因子可通过支架引入,调节细胞生长。确保可行性方法:通过显微技术评估支架的形状和孔径;液体置换法确定孔隙率;实验评估力学性能,包括弹性模量,断裂强度和柔度等;计算降解后残留质量的百分比评估降解性;结合显微技术和组织学染色评估生物相容性。血管化组织工程策略(图2):首先,通过参数化建模或基于micro-CT/MRI的3D重建技术建模。随后,采用生物材料墨水或生物墨水,通过3D打印技术制备支架。随后,对支架特性(如,连通性,三维结构,力学和生化特性)进行表征与验证;引入细胞生长所需的生物活性物质以进行血管化。给出了细胞培养过程面临的挑战:细胞培养的最佳培养条件是什么?制备支架后如何调节血管细胞的生长?如何使支架的降解速率与新血管组织的形成速率相匹配?如何使新血管与体内血管融合形成相互连接的血管网络,从而促进新陈代谢和营养物质的输送?支架技术相比无支架技术的优势:通常无支架技术涉及细胞层片或细胞球体。球状体形成方法:微流体技术,球状体形成的基质和悬滴技术。优势:支架技术为细胞繁殖提供更好的空间结构和生长微环境;支架方法打印的血管支架的特性特别是生物力学和生物化学性质可定制;支架易于细胞攀爬和生长。
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