奇点网▲证实CRISPR编辑T细胞治晚期肺癌安全可行丨临床大发现，《自然·医学》：华西团队发布世界首个CRISPR基因编辑临床试验的数据翘首期盼了近4年

翘首期盼了近4年，终于等到研究成果了。
今天，四川大学华西医院卢铀教授团队在顶级期刊《自然·医学》上发布最新研究成果[1]：使用CRISPR-Cas9编辑的T细胞在临床上治疗疾病是安全可行的。
这项研究成果再次证实了CRISPR基因编辑技术在临床应用中的安全性，为后续类似研究的开展奠定了基础。

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▲论文首页截图
卢铀教授团队发起的这项基因编辑临床研究，其实是世界第一个CRISPR疗法人体试验，开始于2016年6月。
当时的情况是，大量的基础研究证实， CRISPR-Cas9是一种方便、灵活、精确的基因编辑方法。但是CRISPR-Cas9在临床应用中的安全性还需临床研究检验。
在CRISPR-Cas9基因编辑技术冉冉升起的时候，癌症免疫疗法也在蓬勃发展。阻断PD-1/PD-L1通路的PD-1抑制剂，已经成为PD-L1表达阳性的晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的一线治疗药物。这一疗法甚至能将患者的5年生存率提高到15.5%-23%[2] 。
免疫疗法的成功，让卢铀教授团队想到：破坏T细胞的PD-1 ，然后将T细胞回输给患者，对于晚期肺癌的治疗可能也是有效的。
这个猜想一方面是基于免疫治疗的基本逻辑，另一方面是基于当时已经存在的两个基础研究：用锌指编辑技术编辑T细胞的PD-1 ，可以增强T细胞对黑色素瘤细胞的毒性[3]；以及用CRISPR-Cas9破坏T细胞的PD-1 ，可在模式小鼠身上对抗胃癌[4] 。

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▲T细胞和肿瘤细胞之间的PD-1/PD-L1通路
基于以上的研究成果，卢铀教授团队在晚期胃癌患者中，开展了临床研究。由于是首个人体临床试验，考虑到伦理学问题和脱靶突变的风险，他们在剂量递增的I期临床试验中，只招募那些经过多种疗法治疗之后依然无效的NSCLC患者。
在2016年8月26日到2018年3月21日之间，一共招募了22名患者。研究人员从患者体内采集T细胞，然后用电穿孔的方法将CRISPR-Cas9编辑系统转入T细胞中[5] ，破坏PD-1基因的2号外显子。
总体来看，基因编辑的效率在8.7%到31.2%之间，中值是20.1% 。在编辑过的T细胞中， PD-1的表达水平明显降低， PD-1的破坏率在33.7%到67%之间，中值是46.3% 。

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▲基因编辑T细胞的机制，及编辑效果
在招募的22名患者中，有5名患者因T细胞体外扩增不足，没有接受治疗，余下的17名患者均获得了高活性（90%）的编辑后的T细胞。制备T细胞的中位时间是25天（17-40天）。
只不过，在回输编辑过的T细胞之前，有2人疾病进展， 1人肺部感染， 1人类风湿关节炎加重， 1人主动退出研究。最终有12人接受了T细胞的回输治疗。
接受治疗的患者以28天为一个周期，分三次注射PD-1被编辑过的T细胞，直到患者疾病进展或者出现不能耐受的毒性为止，每位患者每次回输T细胞的中位数是1.33亿个。

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▲试验设计流程
从12位接受治疗的患者来看，他们的T细胞中位编辑效率是5.81% 。在所有被编辑的T细胞中。绝大部分是CD3阳性（中值99.1%）， CD3和CD8双阳性占比73.5% 。
与未被编辑的T细胞相比，在被编辑过的T细胞中， CD8和IFN-γ双阳性的占比显著增加。这表明，破坏T细胞的PD-1之后， T细胞的活性增强了。
至于大家最关心的编辑脱靶率，研究人员也做了深入的研究。总体来看，中位脱靶率是0.05% ，远远低于1.69%的中靶率。基于这个数据，研究人员认为， CRISPR-Cas9编辑T细胞是安全的。