金针菇菌种的制作技术 金针菇菌种

在金针菇的第一、二苍菇中选择菌丝生长健壮有力,子实体生长旺盛、清洁无杂菌及病虫害感染的优质菇作为种菇 。进行孢子分离时应选择菌膜即将开裂的种菇 。进行组织分离时宜选用七八成熟,孢子尚未散落的种菇 。采摘后的种菇要及时分离 。

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自然状况下,金针菇都处于细菌、放线菌、霉菌等微生物的包围之中,要获得食用菌纯菌种,就必须将食用菌从这些杂菌的包围中分离出来,经过培育提纯才能获得纯菌种,这一过程即为金针菇纯种分离 。常用纯种分离方法有孢子分离法和组织分离法 。组织分离法操作简单,下代不易发生变异,且能保持原株的优良性状,但生活力不及孢子分离所得的菌种 。将采来的种菇切去菌柄,连同75%酒精及接种用具放入接种箱内进行熏蒸消毒 。
在接种箱内用75%酒精消毒双手、工具及种菇表面,然后用接种刀切开种菇,在菌柄与菌盖的交界处用接种针挑取米粒大小菌肉,迅速移接入PDA培养基斜面,塞好棉塞,置于22~24℃恒温箱中培养,10~15天即可长满试管 。培养过程中要经常检查,如有疑问或杂菌,及时拣出淘汰 。
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孢子分离法要求技术水平较高,多在科研单位采用 。孢子的形成经历了擅子细胞的核配过程、具有双重遗传性,新陈代谢旺盛、发育较强壮,但后代变异性较大,分离时须选择具有优良性状的子实体,并要认真做好出菇试验 。
将采集来的种菇切去大部分菌柄后放入清过毒的接种箱内,用0.1%-0.2%的升汞溶液漫泡1分钟后,取出用无菌水冲洗1~2次,然后再用火过菌的棉花或纱和吸干酯体表面水分后,掀开玻璃钟罩,将种菇用铁丝悬挂在培养皿正上方,盖好钟罩,12-8小时后就可在培养皿内看到一层白色粉状孢子 。用接种环蘸取少许金针菇孢子于灭菌水中稀释,用无菌注射器吸取孢子液在每支试管斜面上滴上几滴,在22~24℃恒温箱中培养,孢子萌发后,挑取萌发早、长势好的菌落,进一步转管培养 。
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母种扩接转管或纯化移接一般在接种箱进行,要求空间无菌,操作人员严格遵守无菌操作规程,先将接利箱收拾干净,再用1%~3%的来苏儿擦抹,然后把接种用的接种针、酒精灯、火柴、酒精棉球、消毒液、待转接的灭过菌的斜面试管及分离而得的母种放入接种箱,进行熏蒸消毒或紫外线灭菌 。


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操作人员穿上经照射消毒的工作服,戴上工作帽,先用1%~3%来苏儿洗手,擦干后再用70%~75%酒精棉球擦一遍,双手伸进接种箱,点燃酒精灯 。在酒精灯火焰上方无菌区内,左手拿分离得到的或购买的母种和待接种的斜面试管,右手拿接种针在酒精灯火焰上烧红,然后拔掉试管棉塞,将管口在火焰上烧一下 。
用烧过的接种针伸入菌种空白培养基中使其冷却,然后挑取绿豆大小一块带菌丝体的培养基,迅速放入待接种斜面的中心位置,再灼烧试管口,烤一下棉塞并迅速将棉塞塞上 。
接种后的试管立即放于22~24℃、空气相对湿度70%左右的通风环境中恒温避光培养,试管的斜面一律向上,每天观察,若有污染及时淘汰,一般经8~13天,菌丝就可长满试管斜面 。长满后的试管及时取出使用或放置到3~5℃的冰箱中贮存 。
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(六)原种及栽培种的制备培养基常用配方配方1:棉籽壳8千克、麦麸或米耕10千克、石灰粉1千克、石青粉1千克,水130千克 。配方2棉籽壳39千克,木屑39千克,米糠10千克,玉米粉9.8千克,石膏粉和石灰粉各1千克,磷酸二氢钾0.2千克,水130千克 。配方3:杂木用78千克,麦族或来椒20千克,糖1千克,石膏粉1千克.水100千克 。
先将棉籽壳、木屑、麦麸或米糠按比例混合拌匀,再将所需其他辅料如石膏、糖、石灰、磷酸二氢钾等溶入水中,再与主料混合拌匀,并用石灰调节pH值至7~9 。
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将拌匀的各种培养料装入专用的菌种瓶或500毫升的罐头瓶,也可用切去瓶嘴后的白酒瓶,装料要求下松上紧,并用捣棒将料面压实,再用直径1.5厘米左右粗的尖木棒打孔,直至瓶底,用棉花塞上瓶口,外加牛皮纸或报纸包扎 。罐头瓶口用一层聚丙烯塑料薄膜外套一层牛皮纸或报纸封住 。