『协和医学杂志』新型冠状病毒核酸与抗体联合检测结果解读( 二 )

4.2.2纤维蛋白的影响：
由于标本凝集不全或离心转速过低、时间太短，血清中的纤维蛋白未完全析出，形成的块状或絮状物堵塞洗板机头。
4.2.3细菌污染标本：
菌体内可能含有内源性HRP ，造成ELISA假阳性结果［23］；此外，疏水性的菌体碎片与金标粒子或捕捉抗体发生结合，影响GICA判读。
4.2.4患者自身原因：
体内存在自身抗体、嗜异性抗体等，如患有某些基础疾病或免疫功能异常，或长期服用某种药物，可产生异常蛋白抗体或特殊物质，如类风湿因子、甲胎蛋白、补体等，具有一定吸附作用，造成抗体检测假阳性［25］。

本文插图
核酸与抗体联合检测可提高诊断效率，当联合检测结果出现以下情况时，需要综合分析判断进行结果解读。
5.1核酸检测阳性时，抗体检测出现阴性或阳性结果
5.1.1核酸阳性， IgM和IgG均为阴性
患者可能处于2019-nCoV感染“窗口期”：“窗口期”是指从人体感染病毒后到外周血中能够检测出病毒抗体的这段时间，一般为2周。这段时间内无法检测血液中的病毒抗体，因此， IgM和IgG均为阴性。此时处于感染早期，病毒不断复制，核酸载量呈指数递增，达到核酸检测下限，核酸检测呈阳性［26-27］。核酸检测较血清抗体检测的优势在于缩短了感染检出窗口期，可及早发现感染者［28］。
5.1.2核酸阳性， IgM阳性、IgG阴性
患者可能处于2019-nCoV感染早期，机体免疫应答最早产生抗体IgM ，暂未产生IgG或IgG含量未达到诊断试剂的检测下限［29］。
5.1.3核酸阳性， IgM阴性、IgG阳性
患者可能处于2019-nCoV感染中晚期或复发感染。病毒刚入侵人体之时，免疫系统首先会产生临时性抗体IgM ，大约1个月后达峰值，随着时间的推移，侵入人体的病毒逐渐被IgM中和， IgM逐渐减少，直至低于检测下限；同时，人体免疫系统会产生持久性抗体IgG ，在感染中晚期， IgG为机体免疫的主力军，浓度高，能够被检测到［30］。恢复期IgG较急性期增加4倍及以上时，可诊断为复发感染［5］。
5.1.4核酸阳性， IgM阳性、IgG阳性
患者处于感染活跃期，但人体已对2019-nCoV产生一定免疫能力（持久性抗体IgG已产生）。
5.2核酸检测阴性时，抗体检测出现阴性或阳性结果
5.2.1核酸阴性， IgM阳性、IgG阴性
IgM阳性提示极大可能处于2019-nCoV感染急性期，此时需考虑核酸检测结果存疑。
出现核酸检测假阴性的原因及应对建议主要有以下几方面：
（1）标本质量差。采集上呼吸道的口、鼻咽拭子等部位标本时，推荐采集鼻咽拭子进行病毒核酸检测，为了提高检测阳性率，建议采集同一患者多部位标本（口咽拭子、鼻咽拭子、鼻腔拭子等）合并检测；对于有消化道症状的疑似患者，可同时采集粪便或肛拭子进行检测［3］。
（2）标本采集保存不当，没有正确保存、运输和处理标本。推荐4 ℃运送标本（因RNA易降解）。
（3）技术本身原因，如病毒变异、PCR抑制等。由于2019-nCoV为单股正链RNA病毒，分子量大，具有易变异的特性，传播过程中可能会产生核酸序列的变异，若处于核酸扩增的引物结合区，就会出现假阴性结果［30］。建议针对多个核酸区域进行扩增，可有效避免核酸变异对检测结果的影响。因此，当核酸检测结果为阴性时，只可报告本次检测结果阴性，不可排除2019-nCoV感染，需多次重复确认［31］。
（4）患者有其他疾病，已发现类风湿因子引起IgM弱阳性或阳性的病例。
5.2.2核酸阴性， IgM阴性、IgG阳性
提示患者可能既往感染2019-nCoV ，但已恢复或体内病毒被清除，免疫应答产生的IgG维持时间长，仍存在于血液中而被检测到。