『协和医学杂志』新型冠状病毒核酸与抗体联合检测结果解读

作者：宁雅婷，侯欣，陆旻雅，吴宪，李永哲，徐英春
单位：北京协和医院检验科
通信作者：徐英春
基金项目：中国医学科学院医学与健康科技创新工程资助项目（2016-12M-1-014）
新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是由2019新型冠状病毒（2019-nCoV）感染引起的以肺部病变为主的新发传染病，可引起消化系统和神经系统的损伤，严重者可导致死亡［1］。
2019年12月以来，疫情进展迅速，截至2020年2月26日24时，我国（港澳台地区除外）累计报告确诊病例78497例，死亡病例2744例，全球疫情亦趋于严峻。

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目前暂无针对2019-nCoV的有效治疗药物，疫苗也处于临床试验阶段，早期诊断、及时收治患者对有效控制疫情至关重要［2］。
《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第六版）》推荐实时荧光RT-PCR检测2019-nCoV核酸阳性是疑似病例确诊的诊断条件之一［3］，但该技术对实验场所及人员要求高、操作繁琐、耗时长，检测人员感染风险高，结果受标本质量、实验条件及人员操作等因素影响较大［4］，核酸单项检测并不能满足排查诊断的要求。

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图片来源与“中国军网” 仅供学习分享
作为机体免疫系统抵抗病毒的重要效应分子，血清特异性抗体是诊断感染的另一关键证据。
抗体检测的操作简单便捷，对实验环境及人员要求不甚苛刻，仅需采集血液标本，很大程度上降低医护人员在标本采集和检测过程中被感染的风险，是快速筛查和核酸辅助诊断的重要手段［5］。
1抗体产生特点机体在接触病毒时， IgM抗体产生最早，但浓度低、维持时间短、亲和力较低，是急性期感染的诊断指标；IgG产生晚，但浓度高、维持时间长、亲和力高，血清IgG阳性提示感染中后期或既往感染［6-7］。
目前临床中常用的抗体血清学检测方法有3种。
2.1酶联免疫吸附试验法
2.2化学发光免疫分析法
2.3胶体金免疫层析法
灵敏度反映诊断试验检出感染者的能力，若过低，会出现较多假阴性结果，影响疾病的诊断、干预和预后，严重可导致患者过早死亡；
特异度衡量诊断试验正确判断非感染者的能力，若过低，则会出现较多假阳性结果，导致医疗资源的浪费，并造成患者及群众的焦虑和恐慌。
因此，具有较高灵敏度和特异度是抗体检测技术的应用基础。
假阳性和假阴性结果会影响临床诊断。为提高2019-nCoV抗体检测的准确性，有必要对可能出现的结果及原因进行深入分析。
4.1抗体检测假阴性
4.1.1防腐剂和抗凝剂：
采用防腐剂叠氮化钠、抗凝剂EDTA等处理标本，会抑制辣根过氧化物酶（HRP）的活性，造成ELISA假阴性。
4.1.2标本保存不当：
当标本在冰箱中保存过久时，血清中IgG聚合成多聚体，且抗体免疫活性减弱。
4.1.3实验员操作失误或试剂盒保存不当：
试剂使用前未平衡至室温，试剂用量不足，温育时间或温度不足；试剂未按规定保存，受到污染或失效等［22］。
4.1.4层析过快：
【『协和医学杂志』新型冠状病毒核酸与抗体联合检测结果解读】抗原抗体复合物尚未与检测线上的抗体结合，就越出检测线，造成GICA假阴性。
4.2抗体检测假阳性
4.2.1溶血或红细胞标本：
红细胞的细胞内液中各种酶可与底物发生非特异性反应，且血红蛋白中亚铁血红素与HRP活性类似，可催化底物，造成ELISA检测假阳性［23］；检测区堆积形成颜色较浅的非特异性条带，干扰目视法判定胶体金试纸结果［24］。