过氧化物酶活性的测定实验报告,过氧化物酶pod活性测定实验报告( 四 ) _知识分享

实际浓度。把浓度约为1M的过氧化氢用本试剂盒提供的过氧化氢酶检测缓冲液稀释100倍，使过氧化氢的浓度约为10mM 。测定
A240 。
过氧化氢(mM)=22.94XA240
从而计算出本试剂盒提供的过氧化氢的实际浓度。然后再根据实际的过氧化氢浓度配制250mM过氧化氢溶液。
b. 配制5mM过氧化氢溶液。根据测定得到的实际过氧化氢浓度配制5mM过氧化氢溶液。
c. 配制显色工作液。在冰浴上溶解显色底物，适当分装后再使用，尽量避免反复冻融。其它试剂放置在冰浴上备用。取适当量的过
氧化物酶，按照1:1000的比例用显色底物稀释，配制成显色工作液。例如取5微升过氧化氢酶，加入5ml显色底物，混匀即得到
5ml显色工作液。
2. 样品的准备：
用适当的裂解液裂解细胞或组织(可以使用碧云天生产的Western及IP细胞裂解液进行裂解) 。用本试剂盒提供的过氧化氢酶检测
缓冲液稀释样品，裂解好的样品至少加入等体积的过氧化氢酶检测缓冲液进行稀释。具体的稀释倍数可以参考表1 。

文章插图
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