4.离子强度和pH值 在最适pH时,酶的活性最强,高于或低于最适pH,酶的活性都降低,多数酶的最适pH在5~8之间 。在测定酶活性时,要求缓冲液具有足够的缓冲容量,以便使pH值保持稳定 。血浆或血清标本含有多种缓冲溶质,具有较强的缓冲能力 。为了防止血浆或血清标本缓冲溶质对反应液酸碱度的影响,使pH不致偏离设定值,标本用量不宜过大,血浆或血清标本体积/反应液体积≤1/10为宜 。
5 辅助因子 某些金属离子和维生素类辅酶是结合酶的辅助因子,例如Zn2+是羧基肽酶的辅基,Mo6+是黄嘌呤氧化酶的辅基,NADH是不需氧脱氢酶的辅酶 。这些酶离开它们的辅基或辅酶就不能表现活性,因此在酶活性测定时,就要保证辅基或辅酶的供给 。
6.启用剂 有些酶在有启用剂存在时才有活性或活性较高,例如Mg2+是肌酸激酶的启用剂,Cl-是淀粉酶的启用剂 。因此在酶活性测定时,也要满足酶对启用剂的需要 。
7.抑制剂 酶的抑制可分为不可逆抑制和可逆抑制,后者又可分为竞争性抑制和非竞争性抑制 。重金属离子和砷化物对巯基酶的抑制、有机磷对羟基酶的抑制属于不可逆抑制;丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制、磺胺类药物对二氢叶酸合成酶的抑制属于竞争性抑制;哇巴因对Na+,K+-ATP酶的抑制属于非竞争性抑制 。抑制剂使酶活性降低,在测定酶活性时,应避免抑制剂的影响 。
进行酶的实验必须注意控制哪些条件?为什么?进行酶的实验必须注意控制环境温度,湿度,PH值,底物的量以及酶的量 。
因为过酸或者过碱的环境会使酶失去活性,而低温会降低酶的活性,高温会使酶失去活性,底物的量和酶的量也会影响酶的实验结果 。
温度和PH对酶活性的影响图:
扩展资料:
酶(enzyme)是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA 。酶的催化作用有赖于酶分子的一级结构及空间结构的完整 。若酶分子变性或亚基解聚均可导致酶活性丧失 。酶属生物大分子,分子质量至少在1万以上,大的可达百万 。
酶是一类极为重要的生物催化剂(biocatalyst) 。由于酶的作用,生物体内的化学反应在极为温和的条件下也能高效和特异地进行 。
参考资料来源:
百度百科-酶
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