趣投稿|如何自动化、标准化捕获测序文库制备?
目标区域捕获测序技术 , 是根据已知特定基因组区域序列设计寡核苷酸探针 , 通过杂交将目标区域捕获富集进行二代测序 。 其针对目标区域深度测序 , 增加了检查灵敏度和准确性 。 既满足研究需求 , 又降低测序成本 , 在科研、临床中均备受关注 。
液体处理专家贝克曼库尔特推出的Biomek自动化捕获测序方案 , 可帮助实现自动化、标准化的捕获测序 。 由自动化工作站进行基因捕获 , 可以减少手工操作时间 , 提高工作效率 , 增加结果的重复性和均一性 。 Biomek工作站可实现从核酸提取 , 文库构建 , 定量混样到捕获的整体实验流程 。
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【趣投稿|如何自动化、标准化捕获测序文库制备?】
图1. 捕获测序文库构建自动化流程 。
由Biomek成功自动化的杂交捕获试剂盒
- Agilent HaloPlex? Target Enrichment - Ion Torrent
- Agilent SureSelect XT?
- Epicentre ScriptSeq? Complete Gold Low Input
- Illumina Nextera? Rapid Capture
- Illumina TruSeq? Exome
- Illumina TruSeq? Rapid Exome
- Illumina TruSight? Cancer
- Illumina TruSight? Tumor 15
- Illumina TruSight? Tumor 170
- IDT xGen? Exome Research Panel
- NEB NEBNext Direct? Cancer HotSpot Panel
- Roche Nimblegen SeqCap EZ? for Illumina NGS
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图2. IDT xGen? Exome Research Panel试剂盒捕获测序文库制备 。 上图: 片段分析 , 其中主峰1和2为杂交捕获后cfDNA目标片段峰;下图:Qubit Fluorometric Quantification核酸定量结果 。
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图3. IDT xGen? 杂交捕获试剂盒历史手工数据vs. Biomek i7自动化工作站完成数据 。 A. 平均中靶率 , B. 重复率 , C. 覆盖度 , D. GC偏移 。
Biomek向导式软件操作界面
在软件操作界面上 , 用户可以选择样本数量 , 是否使用台面整合的PCR仪 , 以及运行工作流程的哪个部分 。 此外 , 具备台面自动校对功能 , 当操作人员完成耗材摆放后 , 工作站可根据摄像头拍摄 , 自动判定耗材摆放是否正确 , 对错误摆放位置进行提示 。 避免由于人为摆放耗材错误 , 导致设备碰撞或试剂、时间损失 。
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图4. 向导式软件操作 , IDT xGen? 杂交捕获试剂盒方法选择界面 。
Biomek自动化捕获测序——实现速度与通量的飞跃
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图5. 完成 24/48/96个样本的自动化IDT xGen?杂交捕获测序文库制备预估耗时 。
进入链接填写问卷 , 下载捕获测序文库构建自动化方案
https://beckmancoulter.wjx.cn/jq/92087762.aspx
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