从化学示踪到荧光标记,科研汪的春天到了

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大家都知道 08 年的诺贝尔化学奖颁给了荧光蛋白的发明者,美籍华裔科学家钱永健(Roger Yonchien Tsien)。钱永健曾说,他从小就喜欢画画,也喜欢漂亮的颜色。



8 岁那一年,爸妈送给他一盒化学工具箱,他把不同的化学物质混合调成漂亮的紫色,这就是他的第一个实验。

他也是我国导弹之父钱学森的堂弟。这不禁让人感叹这又是一个全家都是学霸的典范。

加州大学在钱教授的讣告上评价:钱永健教授的工作照亮了科学,在钱永健教授的诸多重要贡献中,绿色荧光蛋白(EGFP)是知名度最广的成就之一。

在 EGFP 发明之前,科研汪们只能用同位素等化学示踪法来标记分子,而且信号收集时间极长,灵敏度和特异度都差强人意。即使后来发明了 FITC、FAM 等化学荧光物质,信号强度也不是很理想。

最典型的例子要属 AnnexinV-FITC/PE 检测细胞凋亡了。原理如下:

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Fig-1 凋亡原理图片来源:作者原创

但 FITC 信号很弱,PE 信号过强,这样往往照成结果不准确或不够敏感。多亏有了 EGFP,他的荧光强度是 FITC 的数倍,所以今天我们有了 Annexin V-EGFP 细胞凋亡检测试剂盒。



细胞凋亡流式检测试剂盒

不做凋亡的同学可能不知道, FITC 的荧光强度比起 EGFP 简直弱爆了。为改善 Annexin V 的信号强度,使用 EGFP 绝对是一个不错的想法。

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另外一个很赞的例子是荧光上样缓冲液。Instant-Bands 荧光上样缓冲液是一种可用于蛋白 SDS-PAGE 凝胶电泳的荧光上样缓冲液。

它在进行蛋白样品变性处理的同时对蛋白进行预染色,电泳结束后即可直接使用凝胶成像仪的紫外光源或者 LED 灯观察电泳结果。

 

 荧光上样缓冲液 Instant-Bands

染色灵敏度可达 0.1 ng,代替考马斯亮蓝绰绰有余。因为基于荧光技术开发,具有简便、快速、方便、环保等诸多特点,绝对为 Western blot 锦上添花。

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