云克隆诺贝尔化学奖在生物学中的应用
_本文原题:诺贝尔化学奖在生物学中的应用
举世瞩目的 2014 年诺贝尔化学奖揭晓 , 美国和德国科学家艾力克·贝齐格(Eric Betzig)、斯特凡·W·赫尔(Stefan W. Hell)和威廉姆·E·莫尔纳尔(W. E. Moerner) 以其主要贡献——使用荧光分子将光学显微技术带入纳米层次 , 从而突破了自从 1873 年前为光学显微制定的 0.2 微米的物理极限 , 获得了这项殊荣 。
本次奖项针对的主要研究之一是 Eric Betzig 和 W. E. Moerner 的单分子荧光显 微技术 。 该技术已经应用于各研究领域 , 在生物学研究中 , 该技术也得到了长足的 应用 , 例如:研究神经突触的形成过程 , 各种疾病研究中特定蛋白的聚集和降解过 程 , 药物在细胞内的代谢过程等等 。 在这些研究中常用的荧光标记分子有: 异硫 氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate , FITC), 菁类染料(cyanine dyes, Cy2, Cy3, Cy5)等 。
Cloud-Clone Corp.公司在自主制备的普通单克隆抗体和多克隆抗体的基础上 研制了多种标记抗体 , 例如:生物素(biotin) , 辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase, HRP)和异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate , FITC)标记抗体 等 。 其中的 FITC 荧光标记抗体就可以应用于免疫组织化学(Immunonological Histological Chemistry, IHC) , 细胞免疫荧光(Immunofluorescence) , 小动物活体荧光 显微观察等实验中 。
FITC 标记抗体在 IHC 中的应用 , 以 FITC 标记的人前梯度蛋白 2 单克隆抗体 MAC285Hu81 为例 , 其应用于人胃癌组织进行 IHC 检测 , 荧光显微镜下观察结果 如图 1 所示 。
本文插图
图 1. MAC285Hu81 荧光 IHC 检测结果
FITC 标记抗体在细胞免疫荧光实验中的应用 , 以 FITC 标记的 RAS 相关蛋白 RAB5A 单克隆抗体 MAK305Hu81 为例 , 该抗体以及细胞核染料 4',6-二脒基-2-苯 基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole, DAPI) 应用于小 鼠骨髓来 源的巨噬细 胞 (bone marrow-derived macrophages, BMDM)进行细胞免疫荧光实验 , 显微镜下观 察结果展示在图 2 , 3 中 。
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