文献精读 | TLR4-MyD88信号通路参与子宫内膜异位症相关疼痛的发生发展

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背景

BACKGROUND

子宫内膜异位症(EM)是一种常见雌激素依赖性疾病，即子宫内膜组织出现在子宫以外部位。目前全球约1.76亿女性患有子宫内膜异位症。 EM标志症状是异位内膜病变组织周围出现的慢性疼痛，当前常用治疗方法包括给予止痛药、激素、手术和生育治疗。然而，以上治疗方式疗效并不令人满意且通常有副作用。因此，深入了解EM疾病中疼痛的发病机制和开发更有效的治疗方法是必要的。
高迁移率族蛋白1(HMGB1)作为促炎介质，是Toll样受体(TLRs ，包括TLR2、TLR4和TLR5)的内源性配体。前人报道认为HMGB1可能通过激活TLR信号引起痛觉过敏。在固有免疫中， TLRs是外界病原体的“感受器” ， TLR4通过识别病原体相关分子模式以调控下游炎症级联反应来保护宿主细胞。近期研究表明， HMGB1和TLR4结合后诱导招募感觉神经元和神经胶质细胞中的髓样分化因子88（MyD88）和NF-κB因子，该过程与多种类型的疼痛机制相关。神经损伤也能通过HMGB1-TLR4-MyD88信号通路引起背根神经节（DRG）的神经炎症。在脊髓背角（SDH）中， TLR4阳性的星形胶质细胞和小胶质细胞会引起中枢敏化，并产生多种细胞因子诱导疼痛持续发生。
因此，本研究推测子宫内膜异位症由于DRG和SDH中的HMGB1-TLR4-MyD88信号通路被激活，从而促进了相关疼痛的发生发展，并探讨是否能够通过阻断TLR4和MyD88缓解EM相关疼痛症状以寻求EM的潜在治疗策略。
方法
METHODS
建立大鼠子宫内膜异位症模型：成年雌性大鼠在无菌条件下预先腹腔内注射戊巴比妥钠(40mg/kg）。开腹后分离右侧子宫角，切下一厘米组织，放置在含有0.9%NaCl的培养皿中，纵向剖开。将子宫内膜与肌层分离，剪取3 mm×3mm的内膜组织植入右侧腓肠肌上。假手术组（Sham组）遵循相同的步骤，但缝合到腓肠肌上的植入物是3mm×3mm的腹膜脂肪。此外，研究中还设立未进行手术组（Naive组）进行对照比较。
结果
RESULTS
验证大鼠子宫内膜异位症模型有效性
术后3d后，研究者使用电子压力测痛仪确认异位植入内膜组织部位（右侧腓肠肌）是否出现痛觉过敏。行为学测试显示，与Sham组、Naive组相比，内膜组织异位移植组（EM组）大鼠自术后第3天开始出现更强的压痛反应(图1a) 。在术后第7天和第14天，子宫内膜异位模型大鼠的移植部位解剖显示出现囊性病变，而Sham组大鼠却未出现(图1b) 。 HE染色显示EM组异位内膜组织与周围肌肉黏连，成纤维细胞增生，呈现弥漫性充血(图1c) 。结合EM的临床症状和病理表现，研究者确认成功构建子宫内膜异位症的大鼠模型，并发现HMGB1在异位内膜组织中表达上调（图1d）。