师姐,我的 ELISA 实验又失败了,问题出在哪?( 四 )
一
试剂因素
1. 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。
2. 不同厂家的试剂一定不能混用,包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异,还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如:有的厂家酶标板孔间 CV 值大于 20%,标记酶的活性及显色液的稳定性比较差,使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。
3. 要注意试剂的批号和出厂日期,虽然试剂的有效期多为 1 年,最好选择刚出厂的试剂盒。
4. 避免选择假的 ELISA 试剂盒。有些厂家为夸大生产 ELISA 的指标范围,用一种指标来冒充其它指标,造成各种种属、各种指标都可以做的假象。
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