【学长笔记】生物化学-DNA 核酸聚合反应的特点：①DNA新链生成需

核酸聚合反应的特点：

①DNA新链生成需
引物和模板
②核酸新链延长只可沿
5‘ →3’
方向进行

引物(primer): 引物酶催化生成
短链RNA
，为DNA聚合提供
3"-OH末端(
特殊的
RNA聚合酶)

复制、转录、逆转录
方向都是5‘ →3’

1DNA复制

1、半保留复制：
复制时双链解开分别作为模板新合成2条DNA，一条
来自亲代，一条新合成。

2、
双向复制：复制时DNA从起始点向两个方向解链，
形成两个延伸相反的
复制叉
。

3、

半不连续复制

：

领头链

连续复制，

随从链

不连续。

复制沿解链方向连续进行，称领头链。

链复制方向与解链方向相反，不能连续延长，称为随从链。

4、
复制中的不连续片段称为
冈崎片段。

5、DNA复制酶：①DNA拓扑异构酶：解开超螺旋。特点：既
水解又连接磷酸二酯键。
②解螺旋酶：ATP供能，作用于氢键，DNA
开链。
③单链DNA结合蛋白（
SSB
）：复制中维持模板处于单链。
④引物酶：引物生成、催化游离NTP聚合、§依赖DNA的RNA聚合酶。

⑤
DNA连接酶
：连接3‘-OH和5’-P末端，生成磷酸二酯键。基因工程
重要工具（接合缺口，不连续合成，DNA修复/重组/剪接）。

2DNA复制过程

1、复制起始：① 解链：
拓扑异构酶
:松弛超螺旋、
解螺旋酶
:开链、
SSB
:稳定。② 引物：
引物酶
合成
短链RNA
。

原来（原核）CBA（
DnaC、B、A
）够（DnaG、
拓扑异构酶
）傻逼（
SSB
）。①A是字母表的开头，是
起始
点；②B
掰开
→解螺旋酶；③
G
（gou）勾引→引物酶；

2、复制延长：
在
DNA-pol III
催化下dNTP以
dNMP
形式加入，生成
磷酸二酯键
。

3、
I 主任：监督-
纠错
、安排-
填空
、更改-
切除
II 二线：值班突发情况：应急 III 住院医：真正干活

4、核酸外切酶：3’ →5‘外切酶活性：辨认错配碱基并水解。5‘ →3’
外切酶活性：
切除引物和突变DNA

5、
DNA-polⅠ水解后：

小片段：
5‘ →3’核酸外切酶活性
大片段/Klenow 片段:
3"→5" 切除错配碱基对

6、
RNA聚合酶、逆转录酶无3"→5" 外切酶活性，无校对功能，错误率高。

7、
真核生物DNA聚合酶

8、复制终结：原核环状DNA：双向复制在复制终止点汇合。真核DNA复制终止：
岡崎片段连接+
端粒的合成

9、
端粒（telomere）：
真核生物染色体线性DNA分子末端的结构部分，通常膨大成粒状。
fn：
维持染色体稳定性、
维持DNA复制完整性

10、
端粒酶—特殊逆转录酶
①端粒酶
RNA
：提供DNA模板②端粒酶协同蛋白③端粒酶
逆转录酶-蛋白质

11、
原核和真核生物复制区别：

3逆转录病毒和逆转录酶

1、
逆转录：逆转录酶催化下以RNA为模板合成DNA的过程。

2、
逆转录酶特点：
RNA指导DNA聚合活性 RNase H活性 DNA指导DNA聚合活性

3、cDNA：mRNA逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链。可获得目的基因。 4DNA损伤修复

1、物理化学因素损伤DNA：紫外线、化学诱变剂等。

2、突变：错配、缺失、插入、重组(1)错配：DNA分子碱基错配称
点突变
—
镰贫
(2)缺失、插入—框移突变

(3)重排——
地中海贫血

3、DNA修复：(1)光修复 —直接修复，嘧啶二聚体的解聚。(2)切除修复—
最常见，
DNA pol I+ 连接酶。
(3)重组修复—双链损伤。(4)SOS修复—DNA广泛损伤—调节子。