米粒创意|超快CRISPR技术来了!可在亚微米和秒级产生双链断裂

作者丨小柯
米粒创意|超快CRISPR技术来了!可在亚微米和秒级产生双链断裂
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美国约翰霍普金斯大学TaekjipHa、BinWu等研究人员合作开发出超快CRISPR技术 。
该项研究成果发表在2020年6月12日出版的《科学》杂志上 。
研究人员开发了一种笼状的RNA策略 , 该策略能够让Cas9结合DNA , 但在光诱导的激活作用下才能剪切 。
这种方法被称为超快CRISPR(vfCRISPR) , 可在亚微米和秒级产生双链断裂(DSB) 。
米粒创意|超快CRISPR技术来了!可在亚微米和秒级产生双链断裂
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同步切割改善了对DNA修复的动力学分析 , 揭示了细胞在几分钟内对Cas9诱导的DSB作出反应 , 并且在DNA连接后可以保留MRE11 。
【米粒创意|超快CRISPR技术来了!可在亚微米和秒级产生双链断裂】DNA损伤后H2AX的磷酸化每分钟传播100多个碱基 , 达到30兆碱基 。
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使用单细胞荧光成像 , 研究人员表征了53BP1修复灶形成和溶解的多个周期 , 第一个周期比随后的周期更长 , 并且其持续时间受修复抑制作用的调节 。
成像引导的亚细胞Cas9激活进一步促进了单等位基因分辨率的基因组操作 。
vfCRISPR可以在空间、时间和基因组坐标上进行高分辨率的DNA修复研究 。
据悉 , CRISPR-Cas系统提供了用于可编程基因组编辑的多功能工具 。
相关论文:
https://science.sciencemag.org/content/368/6496/1265
小柯报道:
http://news.sciencenet.cn/htmlpaper/2020/6/20206141493039456993.shtm