电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样,所不同的是前者用电子束作光源,用电磁场作透镜 。另外,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片 。这种切片需要用超薄切片机(ultramicrotome)制作 。电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍、由照明系统、成像系统、真空系统、记录系统、电源系统5部分构成 , 如果细分的话:主体部分是电子透镜和显像记录系统 , 由置于真空中的电子枪、聚光镜、物样室、 物镜、衍射镜、中间镜、 投影镜、荧光屏和照相机 。
电子显微镜是使用电子来展示物件的内部或表面的显微镜 。高速的电子的波长比可见光的波长短(波粒二象性),而显微镜的分辨率受其使用的波长的限制,因此电子显微镜的理论分辨率(约0.1纳米)远高于光学显微镜的分辨率(约200纳米) 。
透射电子显微镜(Transmission electron microscope,缩写TEM),简称透射电镜 , 是把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上,电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射 。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像,影像将在放大、聚焦后在成像器件(如荧光屏、胶片、以及感光耦合组件)上显示出来 。
由于电子的德布罗意波长非常短 , 透射电子显微镜的分辨率比光学显微镜高的很多,可以达到0.1~0.2nm,放大倍数为几万~百万倍 。因此 , 使用透射电子显微镜可以用于观察样品的精细结构,甚至可以用于观察仅仅一列原子的结构,比光学显微镜所能够观察到的最小的结构小数万倍 。TEM在中和物理学和生物学相关的许多科学领域都是重要的分析方法,如癌症研究、病毒学、材料科学、以及纳米技术、半导体研究等等 。
在放大倍数较低的时候,TEM成像的对比度主要是由于材料不同的厚度和成分造成对电子的吸收不同而造成的 。而当放大率倍数较高的时候,复杂的波动作用会造成成像的亮度的不同,因此需要专业知识来对所得到的像进行分析 。通过使用TEM不同的模式,可以通过物质的化学特性、晶体方向、电子结构、样品造成的电子相移以及通常的对电子吸收对样品成像 。
第一台TEM由马克斯·克诺尔和恩斯特·鲁斯卡在1931年研制,这个研究组于1933年研制了第一台分辨率超过可见光的TEM,而第一台商用TEM于1939年研制成功 。低压小型透射电镜(Low-Voltage electron microscope, LVEM)采用的电子束加速电压(5kV)远低于大型透射电镜 。较低的加速电压会增强电子束与样品的作用强度,从而使图像衬度、对比度提升,尤其适合高分子、生物等样品;同时,低压透射电镜对样品的损坏较小 。
分辨率较大型电镜低,1-2nm 。由于采用低电压,可以在一台设备上整合透射电镜、扫描电镜与扫描透射电镜 冷冻电镜(Cryo-microscopy)通常是在普通透射电镜上加装样品冷冻设备,将样品冷却到液氮温度(77K),用于观测蛋白、生物切片等对温度敏感的样品 。通过对样品的冷冻 , 可以降低电子束对样品的损伤,减小样品的形变,从而得到更加真实的样品形貌 。
1、结构差异:
主要体现在样品在电子束光路中的位置不同 。透射电镜的样品在电子束中间 , 电子源在样品上方发射电子 , 经过聚光镜,然后穿透样品后,有后续的电磁透镜继续放大电子光束,最后投影在荧光屏幕上;扫描电镜的样品在电子束末端,电子源在样品上方发射的电子束,经过几级电磁透镜缩?。?酱镅??。当然后续的信号探侧处理系统的结构也会不同 , 但从基本物理原理上讲没什么实质性差别 。
2、基本工作原理:
透射电镜:电子束在穿过样品时,会和样品中的原子发生散射 , 样品上某一点同时穿过的电子方向是不同 , 这样品上的这一点在物镜1-2倍焦距之间,这些电子通过过物镜放大后重新汇聚,形成该点一个放大的实像,这个和凸透镜成像原理相同 。这里边有个反差形成机制理论比较深就不讲,但可以这么想象 , 如果样品内部是绝对均匀的物质,没有晶界,没有原子晶格结构 , 那么放大的图像也不会有任何反差,事实上这种物质不存在,所以才会有这种仪器存在的理由 。
扫描电镜:电子束到达样品,激发样品中的二次电子,二次电子被探测器接收,通过信号处理并调制显示器上一个像素发光,由于电子束斑直径是纳米级别 , 而显示器的像素是100微米以上 , 这个100微米以上像素所发出的光,就代表样品上被电子束激发的区域所发出的光 。实现样品上这个物点的放大 。如果让电子束在样品的一定区域做光栅扫描,并且从几何排列上一一对应调制显示器的像素的亮度 , 便实现这个样品区域的放大成像 。
3、对样品要求
(1)扫描电镜
SEM制样对样品的厚度没有特殊要求,可以采用切、磨、抛光或解理等方法将特定剖面呈现出来,从而转化为可以观察的表面 。这样的表面如果直接观察,看到的只有表面加工损伤,一般要利用不同的化学溶液进行择优腐蚀,才能产生有利于观察的衬度 。不过腐蚀会使样品失去原结构的部分真实情况,同时引入部分人为的干扰,对样品中厚度极小的薄层来说 , 造成的误差更大 。
(2)透射电镜
【透射电子显微镜的简介】
由于TEM得到的显微图像的质量强烈依赖于样品的厚度,因此样品观测部位要非常的?。??绱娲⑵髌骷?腡EM样品一般只能有10~100nm的厚度,这给TEM制样带来很大的难度 。初学者在制样过程中用手工或者机械控制磨制的成品率不高,一旦过度削磨则使该样品报废 。TEM制样的另一个问题是观测点的定位,一般的制样只能获得10mm量级的薄的观测范围,这在需要精确定位分析的时候,目标往往落在观测范围之外 。目前比较理想的解决方法是通过聚焦离子束刻蚀(FIB)来进行精细加工 。
扩展资料:
透射电子显微镜的成像原理 可分为三种情况:
(1)吸收像:当电子射到质量、密度大的样品时 , 主要的成相作用是散射作用 。样品上质量厚度大的地方对电子的散射角大 , 通过的电子较少,像的亮度较暗 。早期的透射电子显微镜都是基于这种原理 。
(2)衍射像:电子束被样品衍射后 , 样品不同位置的衍射波振幅分布对应于样品中晶体各部分不同的衍射能力 , 当出现晶体缺陷时,缺陷部分的衍射能力与完整区域不同,从而使衍射波的振幅分布不均匀,反映出晶体缺陷的分布 。
(3)相位像:当样品薄至100?以下时,电子可以穿过样品,波的振幅变化可以忽略,成像来自于相位的变化 。
参考资料:
百度百科-扫描电镜
百度百科-透射电镜
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