台盼蓝染色原理是什么

台盼蓝染色原理:细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA结合,使其着色 。而活细胞能阻止台盼蓝进入细胞内 。
台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活 。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色 。
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内 。而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色 。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡 。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞 。
台盼蓝染色原理是什么?染色原理
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色 。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡 。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞 。
台盼蓝拒染法
台盼蓝拒染法是利用台盼蓝只能将死细胞染成蓝色而活细胞不能被染上的方法检测细胞存活率的一种快速简便的方法 。
中文名
台盼蓝拒染法
染色原理
正常细胞具有完整的细胞膜结构,而死亡的细胞其细胞膜结构被破坏 。台盼蓝无法通过正常的细胞膜因而正常的细胞不被台盼蓝染上,而死细胞则可被台盼蓝染成蓝色 。
流程
(1)将对数生长期的细胞浓度调整为1~10×10细胞/ml,按10~10个细胞接种于96孔板,每孔100 μl;
(2)培养细胞24小时后,对其进行不同处理,每个处理设三个平行对照;
(3)收集细胞,经台盼蓝染色,在倒置显微镜下计数蓝染及不染色细胞,计算细胞存活率;
(4)结果统计:
镜下观察,死细胞被染成淡蓝色,而活细胞拒染 。
根据下式求细胞活力:
活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100
注意事项
台盼蓝染细胞时,时间不宜过长 。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数 。
台盼蓝染色鉴别死活细胞的原理是什么?通常认为细胞膜丧失完整性,细胞即可被认为已经死亡 。台盼蓝是检测细胞膜完整性最常用的生物染色试剂 。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝,而死亡的细胞,膜的完整性丧失,通透性增加,细胞可被台盼蓝染成蓝色 。
染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀 。(终浓度0.04%) 。
计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞 。
镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状 。
扩展资料:
机理:
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色,通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反 。
因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞 。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一 。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象 。
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量 。台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单 。
【台盼蓝染色原理是什么】参考资料来源:百度百科-台盼蓝
台盼蓝为细胞染色的原理是什么通常认为细胞膜丧失完整性,细胞即可被认为已经死亡 。台盼蓝(TrypanBlue)是检测细胞膜完整性最常用的生物染色试剂 。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝,而死亡的细胞,膜的完整性丧失,通透性增加,细胞可被台盼蓝染成蓝色 。依据此原理,细胞经台盼蓝染色后,可通过显微镜
,直接镜下计数或拍照后计数,实现对细胞存活率比较精确的定量分析 。