纸上层析法到底是什么啊 _纸上层析

纸上层析法：利用混合物中各组分在固定相和流动相中的溶解度不同而达到分离目的，常用滤纸作载体，滤纸上所吸收的水分作固定相，有机溶剂作流动相，称展开剂；
酚酞和甲基橙混和溶液的纸上层析步骤：
1、以氨水的正丁醇饱和溶液作展开剂，利用长条形滤纸进行层析，利用圆形滤纸进行层析；
2、以乙醇和氨水的混和溶液作展开剂，利用长条形滤纸进行层析，利用圆形滤纸进行层析；
3、以氨化市售白酒作展开剂，利用长条形滤纸进行层析，利用圆形滤纸进行层析。
何谓纸层析法纸层析法又称纸色谱法。以纸为载体的色谱法。固定相一般为纸纤维上吸附的水分，流动相为不与水相溶的有机溶剂；也可使纸吸留其他物质作为固定相，如缓冲液，甲酰胺等。将试样点在纸条的一端，然后在密闭的槽中用适宜溶剂进行展开。当组分移动一定距离后，各组分移动距离不同，最后形成互相分离的斑点。将纸取出，待溶剂挥发后，用显色剂或其他适宜方法确定斑点位置。根据组分移动距离（Rf值）与已知样比较，进行定性。用斑点扫描仪或将组分点取下，以溶剂溶出组分，用适宜方法定量（如光度法、比色法等）。在环境分析测试中，有时用纸层析法分离试样组分，它用于一些精度不高的分析，如3 ， 4-苯并芘。但不如GC、HPLC应用普遍。
纸上层析纸上层析是利用混和物中各组分在固定相和流动相中的溶解度不同而达到分离目的,常用滤纸作载体,滤纸上所吸收的水分作固定相,有机溶剂作流动相,称展开剂.层析法有专用滤纸,也可用质量较好的普通滤纸代替.滤纸要清洁、均匀、平整,剪好的滤纸条没有斜的纸纹,按一定规格剪成纸条备用.所用展开剂应对被分离物质有一定溶解度,通常为含一定比例水的有机溶剂.如分离甲基橙和酚酞可用水-正丁醇溶液作展开剂.
操作时,先要点样.取少量试样,用水或易挥发的有机溶剂（如乙醇、丙酮等）使它完全溶解,配制成浓度约1％的溶液.在滤纸上距一端约2～3厘米处用铅笔画一记号作为原点,用毛细管或微量注射针筒吸取少量试样溶液在原点滴一小滴,每滴试样体积为2×10-3～2×10-2毫升,控制点样直径在0.0.5厘米左右.晾干后再在原点处重复上述操作1～2次.将已点样并晾干的滤纸悬挂在层析槽内,并使滤纸下端（有点样一端）边缘浸入展开剂液面下约0.1厘米,但点样的位置必须在展开剂液面之上,将层析槽盖上.借助于毛细现象,展开剂带动试样中各组分以不同速度沿滤纸逐渐向上移动,因各组分在固定相和流动相中溶解度不同,从而使混和物中各组分在流动相中移动距离不同而得到展开.有的组分展开后就可显示出不同颜色,但有的组分展开后不显色,还要进行显色反应.一般可用显色剂喷雾法使各组分显色,如分离甲基橙和酚酞时用氨水作显色剂,酚类可用三氯化铁的乙醇溶液显色,也有用紫外光照射显色的.
纸层析的概念和原理？纸层析法（paper
chromatography）是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术，可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法，其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相，展层用的有机溶溶剂是流动相。在层析时，将样品点在距滤纸一端约2～3cm的某一处，该点称为原点；然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层，这样混合氨基酸在两相中不断分配，由于分配系数（kd）不同，结果它们分布在滤纸的不同位置上。物质被分离后在纸层析图谱上的位置可用比移值（rate
of
flow,
rf）来表示。所谓rf ，是指在纸层析中，从原点至氨基酸停留点（又称为层析点）中心的距离（x）与原点至溶剂前沿的距离（y）的比值：
在一定条件下某种物质的rf值是常数。rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关。
简述纸层析的基本原理.如题纸层析：是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维和水有较强的亲和力，能吸收百分之22左右的水，而且其中百分之6到百分之7的水是以氢键形式与纤维素的羟基结合，所以在一般条件下较难脱去。而滤纸纤维与有机溶剂的亲和力很弱，所以一般的纸层析实际上是以滤纸纤维的结合水为固定相，以有机溶剂为流动相