异硫氰酸苯酯的稳定性,在酸性条件下稳定吗

异硫氰酸苯酯的稳定性,在酸性条件下稳定吗1. 在空气中迅速氧化,少量铜、铁、锰离子的存在能加速氧化过程 。浓度小于70%(重量)的巯基乙酸水溶液,在室温下贮存是稳定的 。在高浓度时,则会生成一定量的各种自酯化物 。遇明火、高热能燃烧并放出有剧毒的硫化氢气体 。
2.稳定性 稳定
3.禁配物 强氧化剂
4.避免接触的条件 受热
5.聚合危害 不聚合
6.分解产物 硫化物
edman降解法是什么?edman降解法是用异硫氰酸苯酯测定肽链的N末端氨基酸的PTH法,又称为Edman降解法(异硫氰酸苯酯法) 。
Edman降解法的基本原理是异硫氰酸苯酯(PITC)能在温和条件下与含有自由氨基的多肽或蛋白质发生偶联反应,生成的苯氨基硫甲酰衍生物经过环化,从肽链上断裂下来,然后转变为PTH-氨基酸 。利用PTH-氨基酸在紫外光下有强吸收,可以用色谱进行鉴定 。
Edman降解法包括以下步骤:
1.偶联反应碱性条件下、在氮气中,异硫氰酸苯酯与N末端的氨基反应形成苯氨基硫甲酰肽(PTC-肽)的衍生物 。洗涤除去过量的PITC和缓冲液后的样品被彻底干燥 。
2.裂解反应在无水酸的作用下,PTC-肽发生特异性裂解,产生游离的初始N末端氨基酸的噻唑啉酮和丢失了原N末端残基的变短的多肽 。萃取将噻唑啉酮萃取至疏水有机溶剂中,与变短的多肽分离 。
3.转化反应在稀酸作用下,使不稳定的噻唑啉酮转换为稳定的乙内酰苯硫脲氨基酸(PTH-氨基酸) 。鉴定用TLC或HPLC分析,与标准图谱比较鉴定PTH-氨基酸 。
0.1mol/l异硫氰酸苯酯的乙腈溶液怎么配?这个是摩尔浓度
假设配制100mL溶液,先计算所需要的溶质质量
0.1mol/L×100mL/1000mL=0.1×0.1=0.01mol
异硫氰酸苯酯质量=0.01×摩尔质量
然后按计算量称取出来,加入到100mL乙腈中,搅拌均匀即可
fndb法和edman降解法原理相同吗fndb不知道是什么降解法,不能判断和edman降解法原理是否相同 。
下面是Edman降解原理:
Edman降解(Edman degradation):是测定蛋白质一级结构的方法,主要是从蛋白质或多肽氨基末端进行分析 。由埃德曼(P.Edman)在上世纪50年代所创立 。分为耦合、切割、萃取、转化、鉴定等几个步骤 。首先在pH9.0的碱性环境下,将异硫氰酸苯酯(Ph—N=C=S,PITC)和蛋白质或多肽N端氨基酸耦合,形成苯氨基硫甲酰(PTC)衍生物;然后以三氟乙酸(TFA)处理耦合后产物,将多肽或蛋白的N一端第一个肽键选择性的切断,释放出该氨基酸残基的噻唑啉酮苯胺衍生物;随后萃取出释放的氨基酸衍生物并在强酸性条件下转化为稳定的乙内酰苯硫脲氨基酸(PTH-氨基酸);最后以色谱法鉴定出降解下来的PTH-氨基酸种类,从而得到蛋白质或多肽N端序列信息 。Edman降解法的优点是异硫氰酸苯酯与所有氨基酸残基的反应产率和回收率都相当高,因此反应副产物少,用色谱可以准确鉴定 。而且对大多数氨基酸残基而言,30 min的耦合反应时间、5 min的切割反应时间都已足够 。
常用于蛋白质多肽链N端.C端测定的方法有几种常用于蛋白质多肽链N端测定的方法:
1、二硝基氟苯法(FDNB法)
2、二甲基氨基萘磺酰氯法zhi(DNS-Cl法)
3、异硫氰酸笨酯法(Edman法)
常用于蛋白质多肽链C端测定的方法
1、肼解法
2、还原法
3、羧肽酶法

扩展资料:
多肽合成是一个固相合成顺序,一般从N端即氨基端向C端即羧基端合成 。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法 。
液相合成基于将单个N-α保护氨基酸反复加到生长的氨基成份上,合成一步步地进行,通常从合成链的C端氨基酸开始,接着的单个氨基酸的连接通过用DCC,混合炭酐,或N-carboxy酐方法实现 。
参考资料来源:百度百科-多肽合成
蛋白质多肽链N端测定的方法及基本原理1.甲醛滴定法:氨基酸氨基的PKa值较小,羧基的PKa值较大,若用滴定法测定氨基或羧基竭力释放出的H+,均找不到合适的试剂 。但若加入甲醛溶液中,氨基酸中的氨基作为亲和试剂与甲醛中的羧基发生加成反应,使氨基酸氨基的PKa下降,以酚酞为指示剂,用NaOH滴定测定游离氨基的含量 。
2.
2,4-二硝基氟苯的反应
氨基酸的α-氨基与.
2,4-二硝基氟苯在弱碱性溶液中作用,生成稳定的.
2,4-二硝基氟苯氨基酸,呈黄色 。
3.丹磺酰氯DNS-CL
氨基酸的α-氨基与..丹磺酰氯DNS-CL
生成的5-二甲氨基萘磺酰氨基酸有强烈的荧光,可以荧光光度计检测出来 。
4.与异硫氰酸苯酯反应
在在弱碱性条件下,氨基酸的α-氨基与异硫氰酸苯酯反应,生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸,与酸作用会环化为苯硫乙内酰脲,在酸中较稳定 。生成的苯氨基硫甲酰氨基酸经乙酸乙酯抽提干,用层析法进行鉴定,确定N端氨基酸的种类 。