实验室玉米提取脂肪酸的方法和步骤!

实验室玉米提取脂肪酸的方法和步骤!A.1 范围
本方法规定了玉米储存品质判定 。
A.2 原理
在室温下无水乙醇提取玉米中的脂肪酸 , 用标准氢氧化钾溶液滴定 , 计算脂肪酸值 。
A.3 试剂和材料
除非另有规定 , 仅使用分析纯试剂 。
A.3.1 无水乙醇 。
A.3.2 酚酞—乙醇溶液(10g/L);1.0g酚酞溶于100mL95%(V/V)乙醇 。
A.3.3 不含二氧化碳的蒸馏水:将蒸馏水烧沸 , 加盖冷却 。
A.3.4 c(KOH)=0.01mol/L氢氧化钾—95%乙醇标准滴定溶液 。
A.3.4.1 c(KOH)=0.5mol/L氢氧化钾标准储备液的配置
称取28g氢氧化钾 , 置于聚乙烯容器中 , 先加入少量无CO2的蒸馏水(约20ml)溶解 , 再将其稀释至1000ml , 密闭放置24h.吸取上层清液至另一聚乙烯塑料瓶中 。
A.3.4.2 c(KOH)=0.5mol/L氢氧化钾标准储备液的标定
称取在105℃烘2h并在干燥器中冷却后的邻苯二钾酸清钾2.04g , 精确到0.0001g , 溶于50ml不含CO2蒸馏水中 , 滴加酚酞-乙醇指示剂(A3.2)3~5滴 , 用配制的氢氧化钾标准储备液滴定至微红色 , 以30s不褪色为终点 , 记下所耗氢氧化钾标准储备液ml数(V1) , 同时做空白试验(不加邻苯二钾酸氢钾,同上操作) , 记下所耗氢氧化钾标准储备液ml数(V0),按式计算氢氧化钾标准储备液浓度 。
100×m
c(KOH)= —————————………………….(1)
(V1-V0) ×204.22
式(1)中:
c(KOH)—氢氧化钾标准储备液浓度 , mol/L;
1000—换算系数:
m—称取邻苯二甲酸氢加的质量 , g;
V1—滴定所耗情氧化钾标准储备液体积 , ml;
V0—空白试验所耗氢氧化钾标准液体积 , ml;
204.22—邻苯二钾酸氢钾的摩尔质量g/mol.
注:氢氧化钾标准储备液按要求定时复标 。
A.3.4.3 c(KOH)=0.01mol/L氢氧化钾-95%乙醇标准滴定溶液
准确移取20.0ml/L氢氧化钾标准储备液 , 用95%(V/V)乙醇稀释定容至1000ml,盛放于聚乙烯塑料瓶中 。临用前稀释 。
注:稀释用乙醇应事先调整为中性 。
A.4 仪器与设备
A.4.1 具塞磨口锥形瓶:250ml.
A.4.2 移液管:50.0ml、25.0ml.
A.4.3 微量滴定管:5ml , 最小刻度为0.02ml:10ml , 最小刻度为0.05ml.
A.4.4 天平:感量为0.01g以上 。
A.4.5 振荡器:往返式 , 震荡频率为100次/min.
A.4.6 粉碎机:锤式旋风磨 , 具有风门可调和自清理功能 , 以避免样品残留和出样管堵塞 。在粉碎样品时 , 磨膛不能发热 。
A.4.7 电动粉筛:按GB/T 5507要求 。
A.4.8 玻璃短颈漏斗 。
A.4.9 中速定性滤纸 。
A.4.10 锥形瓶:150ml.
A.5试样制备
取混合均匀样品约80~100g , 用锤式旋风磨粉碎 , 要求粉碎细度能一次性达95%以上过CQ16(相当于40目)筛 , 粉碎样品充分混合后(筛上、筛下的全部筛分范围样品)装入磨口瓶中备用 。
注:1:按GB/T 5507检验样品粉碎细度 , 使用其它类型粉碎机可以达到细度要求 , 粉碎样品也只能选用锤式旋风磨 。一次粉碎达不到细度要求的 , 该锤式旋风磨不能使用 。
注:2:粉碎样品时 , 应按照设备说明书要求 , 合理调节风门大小 , 并控制进样量 , 防止和减少出料管留存样品 , 未必免出料管堵塞 , 减少磨膛发热 , 引起样品中脂肪酸值的变化 , 每粉碎10个样品应将出料管拆下清理 。
注:3:制备耗的样品应尽快完成测定 , 如需较长时间存放 , 应存放在冰箱中 , 全部过程不得超过24h 。
A.6 分析步骤
A.6.1 试样处理
称取制备试样约10g , 精确到0.01g , 于250ml具塞磨口锥形瓶中 , 并用移液管准确加入50.0ml无水乙醇(A3.1)置往返式震荡器上振摇30min,震荡频率为100次/min 。静置1~2min , 在玻璃漏斗中放入折叠式的滤纸过滤 , 并加盖滤纸 。弃去最初几滴滤液 , 收集滤液25ml以上 。
A.6.2 测定
精确移取25.0ml滤液于150ml锥形瓶中 , 加50ml不含CO2的蒸馏水 , 滴加3~4滴酚酞-乙醇指示剂后 , 用0.01mol/L的氢氧化钾—95%乙醇标准滴定溶液(A3.4.3)滴定至呈微红色 , 30s不消褪为止 。记下耗用的氢氧化钾—95%乙醇溶液体积(V1) 。
注:样品提取后一定要及时滴定;滴定应在散射阳光或日光型日光灯下对着光源方向进行;提取液颜色较深 , 滴定终点不易判定时 , 可用一已加入去CO2蒸馏水后尚未滴定的提取液作参照 , 当被滴定液颜色与参照相比有色差时 , 即可视为已到滴定终点 。若上述参照比色法 , 仍无法准确判定滴定终点时 , 可在滤纸锥头放入0.5g粉末活性炭 , 褪色后滴定 。