什么是制备性高效液相色谱 _色谱柱各参数有什么意义

什么是制备性高效液相色谱高效液相色谱是一种分析方法，制备色谱是一种分离纯化手段。高效液相色谱把普通的色谱柱换成制备柱，就是制备液相色谱，两者的区别在于一种以分析为目的，追求的是检测精度，样品承载量非常小；制备色谱以分离纯化为目的，它追求的是样品承载量，检测精度很低，检测只用作鉴别即可。
另外，制备色谱不仅可以用高效液相，还可以用气相色谱、薄层色谱、层析柱等多种载体，目前主流的制备色谱是高速逆流色谱（ high-speed countercurrent chromatography，HSCCC ）。
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色谱柱各参数有什么意义意义：聚合物基质多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化学稳定，应用pH范围宽，具有更强的疏水性，对蛋白质等样品分离效果较好;但强度较小，有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损，批次重复性较差，商品化色谱柱不多，一般价格较贵。
一、液相色谱柱物理性质参数
1、柱长，内径
如250*4.6mm 。一般柱长在2—250mm，柱越长，分离度越高，但柱压更高，分离所需时间更长;但分离度与理论塔板数的平方根成正比，所以一昧增加柱长并不是最有效的分离手段，一般情况下，150mm、5um的填料可以提供足够的塔板数。
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2、粒径
粒径影响色谱分离度。粒径越小，分离越快，柱效越高，但柱压力越高，柱容易被污染，导致柱寿命降低。常见分析柱通常使用5um填料，复杂的多组分样品分离一般使用3.5um粒径，更大内径的制备色谱柱通常使用更大的粒径。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而，3.5um的色谱柱的背压却是5um的2倍，因此如何选择填料粒径需要根据现实情况而定。
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3、孔径　
孔径，60A，120A，300A等。孔径小，则含孔率高，比表面积大，载碳量高;色谱柱填料孔径大小需和分子大小相匹配，保证分子自由进出填料孔并与孔内表面的键合相进行分离分配，通常要求孔径直径是分子直径的3倍以上，一般小分子使用80—120A，大分子使用300A 。
中压制备色谱的介绍中压制备色谱是一般由泵提供压力，压力在5~20bar 。中低压色谱柱与常压柱、HPLC柱有比较大的不同：在使用是是封闭的，但是可以比较方便的打开与调节长度，这与中低压色谱常常固体上样相适应的。中低压制备色谱柱的材质主要有塑料柱、玻璃柱、不锈钢柱三种。
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