7分+文献解读｜纯生信分析玩不转？干湿结合发高分才是主流( 二 ) ：7分+文献解读

6.KCNJ5是结肠癌肿瘤微环境的关键因子
为确定肿瘤免疫浸润的关键因子，作者选择5个上调基因进行进一步学习。这5个基因为CX3CL1,CCNA1,NFATC1,KCNJ5和SFRP2 。作者使用PMA ， IL-4和IL-13诱导M2巨噬细胞，其中有80%的M2巨噬细胞标记了M2markerCD206（图6B,6C和6E）。与M2巨噬细胞共培养的HCT-8细胞中， KCNJ5的表达量最高（图6A和6D ，表2）。为了研究KCNJ5的趋化作用，作者进行transwell分析（图6F-6I）。这些结果表明， KCNJ5是结肠癌M2巨噬细胞招募和肿瘤微环境重塑的关键调节因子，可以在肿瘤免疫浸润和肿瘤进展中起到重要作用。

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图6KCNJ5功能研究
7.体内实验研究KCNJ5对M2巨噬细胞浸润和异种移植生长
构建动物模型研究体内KCNJ5的肿瘤免疫浸润。裸鼠分为两组，分别为携带scramble和shKCNJ5慢性病毒转导的结肠癌移植。肿瘤移植的免疫荧光结果表明， KCNJ5消耗（shKCNJ5）显著降低M2巨噬细胞浸润（图7D和7E）。流式细胞仪数据表明， shKCNJ5显著降低了异种移植肿瘤中浸润的M2巨噬细胞的比例（图7F和7G）。 shKCNJ5还会显著抑制异种移植肿瘤的生长（图7A和7C），然而两组的体重没有明显变化（图7B）。这些结果表明， KCNJ5在体内对M2巨噬细胞浸润和肿瘤微环境重塑具有调节作用。
结论本研究作者基于471例结肠癌患者的数据证明KCNJ5在结肠癌中是肿瘤免疫浸润调控因子。并根据ESTIMATE算法鉴定与结肠癌预后有关的免疫微环境相关基因。最后，作者确认了KCNJ5对M2巨噬细胞浸润和肿瘤微环境重塑的影响。这些发现为阐明癌细胞和肿瘤微环境之间的互作作用提供新的见解。本文的局限性在于需要进一步实验验证KCNJ5的免疫调控机制，需要额外的验证数据验证本研究的准确性。
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