Normalase工具盒减少测序后数据不均匀的烦恼
原标题:Normalase工具盒减少测序后数据不均匀的烦恼
在NovaSeq时代 , 单次实验可以产出3TB的数据量 。 每次实验都需要将多个不同的文库样本混合进行测序 。 如何解决不同样本之间数据的均一性 , 如何降低Indexhopping成为每位实验者不得不考虑的问题 。
Swift公司的NormalaseKit , 可以有效解决上述两个问题 。 NormalaseKit采用新型的酶技术 , 使文库标准化 。 实验过程快速、稳定、通量灵活 , 可节省测序和人工成本 。 接下来看看实际应用中的数据
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图A:采用Swift2STurbo建库的16个文库 , 文库起始量分别为1-250ng , 经qPCR验证 , 摩尔浓度均≥12nM , 符合NormalaseKit实验前提
图B:使用NormalaseKit定量
【Normalase工具盒减少测序后数据不均匀的烦恼】图C:使用qPCR定量 。 同时采用IlluminaMiSeqv21x50循环测序试剂进行测序 , 结果清晰可见 。 采用NormalaseKit定量的CV值5.6% , qPCR定量的CV值23.9% , NormalaseKit的平衡性远远优于qPCR定量
NormalaseKit的使用还可以降低IndexHopping 。 使用NormalaseKit标准化文库 , 能使IndexHopping减少到十分之一 。
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