每日一题

科学家利用土壤农杆菌把编码霍乱毒素的无毒性β链的基因转移到苜蓿细胞，再将其培养成幼苗，食用这种苜蓿苗后，霍乱毒素β链很快被喉、肠胃等部位的分泌性粘液细胞吸收，刺激特异性抗体的大量产生，使机体获得对霍乱的免疫。其具体过程如下：

（1）构建重组DNA分子常用的工具酶是________，基因工程中构建基因表达载体的目的是________。

（2）图中过程②采用的方法是________，Ti质粒上有一个tms片段能促进生长素的大量合成，在对Ti质粒改造时要将该片段去除，其原因是________。

（3）该实验中将农杆菌转入苜蓿细胞的原生质体后，需再生细胞壁，实验室检测原生质体是否再生出细胞壁的方法是________。

（4）含目的基因的苜蓿细胞通过植物组织培养技术培养，经过________ 、________两个重要阶段能发育成幼苗。

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（1）限制酶和DNA连接酶；使目的基因在宿主细胞中稳定地复制并表达

（2）农杆菌转化法；防止植物（苜蓿）体内生长素浓度过高而抑制植物（苜蓿）生长

（3）将细胞置于高渗溶液中，观察是否发生质壁分离

（4）脱分化；再分化

解析：

（1）基因工程中常用的工具酶有限制酶和DNA连接酶。构建基因表达载体的主要目的是使目的基因在宿主细胞中稳定地复制并表达。

（2）图中过程②是利用农杆菌将重组质粒导入植物细胞，这种方法称为农杆菌转化法。Ti质粒上有一个tms片段能促进生长素的大量合成，如果合成的生长素浓度过高会抑制植物（苜蓿）生长，所以在对Ti质粒改造时要将该片段去除。

（3）将细胞置于高渗溶液中，观察是否发生质壁分离，是实验室检测原生质体是否再生出细胞壁的常用方法。

（4）植物组织培养技术包括脱分化和再分化过程。

考点：考查基因工程的相关知识

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