国家卫健委:对重点大型集贸市场每周1次新冠病毒监测( 三 )
2.样本保存:用于病毒分离和核酸检测的标本应当尽快进行检测 , 能在24小时内检测的标本可置于4℃保存;24小时内无法检测的标本则应当置于-70℃或以下保存(如无-70℃保存条件 , 则于-20℃冰箱暂存) 。
【国家卫健委:对重点大型集贸市场每周1次新冠病毒监测】(二)污水水样前期处理 。 使用离心技术去除污水中杂质 。 先打开低温离心机 , 待温度降至4℃左右 , 建议4654离心力离心30分钟 , 取上清 。 再使用膜吸附技术或超滤技术进行上清液的浓缩 。
(三)核酸提取 。 新型冠状病毒的常规检测方法是通过实时荧光RT-PCR鉴定 。 任何新型冠状病毒的检测都必须由经过相关生物安全及技能培训的人员进行操作 。 对已经灭活的样本 , 应当在生物安全二级(BSL-2)实验室内 , 使用自动化核酸提取仪 , 配套核酸提取试剂盒进行病毒核酸的提取 。 核酸提取后 , 应当将核酸产物进行分装 , 用于后续核酸实时荧光定量(RT-PCR)及深度测序 。 核酸提取操作参考相关厂家试剂盒说明书开展 。
(四)实时荧光定量PCR 。 在BSL-2实验室中对所有已提取的核酸样本 , 应当用经CFDA批准的RT-PCR诊断试剂进行新型冠状病毒核酸检测 , 以保证实验结果的正确可靠 。 RT-PCR反应体系和操作参考相关厂家试剂盒说明 。 每一次RT-PCR反应均应当设置阴性对照、阳性对照和无模板空白对照 , 以确保扩增体系工作正常 。
五、实验室生物安全
实验室安全级别参照最新版《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》的相关内容进行管理 。 采集的环境样本属于未经培养的感染性材料 , 在采用可靠的方法灭活前进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分析 , 以及临床样本的灭活等操作 , 应当在生物安全二级实验室进行 , 同时采用生物安全三级实验室的个人防护 。 环境样本在采用可靠的方法灭活后进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等操作应当在生物安全二级实验室进行 。
附表:新型冠状病毒环境检测标本送检表
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