#抗体#寻找新冠肺炎康复者血浆中的抗体,何时算是成功?( 三 )


实验过程中 ,Beacon(一台单细胞平台)立了大功 。 这种实验设备 , 一般大型药厂才会配备 , 主要是为了加速抗体药物的研发 。 大学实验室里并不多见 , 国内目前只有四五台类似设备 。 恰巧 , 北京有一台 。
其实 , 哪里有什么“恰巧” 。 北京市肝病研究所的这台Beacon , 是陈德喜力主 , 在市级财政支持下购置的 。 “当时购买就是认识到感染与传染性疾病走到现在 , 其瓶颈就是以抗体为基础的微生物诊断和治疗 。 ”陈德喜说 。
如果描述实验过程 , 对于普通人来说 , “字都认识 , 但就是看不懂” 。 不过 , 实验过程中的一些数据 , 足以说明陈德喜和团队的精益求精 , 科学严谨——
“每个培养孔大约0.24纳升 。 1纳升等于0.000001毫升 。 ”
“先导入分泌抗体的细胞 , 再导入表达ACE2(新型冠状病毒的受体)的细胞 , 可一次导入4个以上(考虑到病毒感染细胞的感染率问题 , 每个培养孔需要导入多个) 。 ”
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经过培养 , 如果表达ACE2的细胞开始“发光” , 说明被感染 , 如果不表达 , 说明被中和 。
【#抗体#寻找新冠肺炎康复者血浆中的抗体,何时算是成功?】到了这一步 , 并非终点 , 只是另一种开始 。 陈德喜和团队还要不断地筛选 , “每三到五个氨基酸就会产生一个抗体 , 这些抗体强弱不一 , 有些抗体具有中和活性 , 有些具有诊断价值 , 我们要找到的就是具有高中和活性的中和抗体产生B细胞 。 ”
截至目前 , 陈德喜和团队 , 已从佑安医院收集了20例治愈后随访的新冠肺炎患者全血 , 每人10毫升 , 进行了6次抗体筛选 。 然后利用Beacon筛选单个抗体分泌B细胞 , 经过单细胞导入、抗体分泌检测、阳性细胞导出等步骤获得阳性单克隆B细胞600余株 , 已建立了单个B细胞cDNA文库500个 , 经抗体可变区PCR(聚合酶链式反应)后 , 获取100余个H链和L链同时阳性克隆 。
从3月7日到13日 , 陈德喜和团队通过抗体小样验证 , 已经获取了针对新型冠状病毒刺突蛋白spike和N蛋白的特异抗体上百株 , “我们建立的这个库的‘库存’足够大 , 有望从中找到高效诊断以及中和抗体 。 ”陈德喜说 。
“寻找”还在继续 , 工作还有很多——
“根据小样的抗体来源进一步利用大样进行抗体效价和亲和力实验 , 有望在3月下旬 , 获得可用于开发超敏诊断和强中和效应的治疗抗体 。 ”
“3月底到4月份通过和在京生产厂家联合攻关 , 实现快速产业化 , 并把试剂盒和中和抗体推广 。 ”
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